== 色譜理論 ==

色譜法的分離原理：溶于流動(dòng)相（ phase）中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相（stationary phase）之間的相互作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強(qiáng)弱不同，樣品各組分在固定相與流動(dòng)相中的溶解各不相同,從而經(jīng)過(guò)固定相時(shí)的滯留時(shí)間不同，先后從固定相中流出時(shí)間各不相同。
    液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。液相色譜法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱(chēng)高壓液相色譜法（High Pressure Liquid Chrmatography，HPLC）。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法（High Speed Liquid Chrmatography ，HSLP）。也稱(chēng)現(xiàn)代液相色譜。

    == 色譜常用術(shù)語(yǔ) ==
·色譜圖（Chrmatography）——樣品流經(jīng)色譜柱和檢測(cè)器，所得到的信號(hào)-時(shí)間曲線，又稱(chēng)色譜流出曲線（elution profile）。
·基線（base line）——經(jīng)流動(dòng)相沖洗，柱與流動(dòng)相達(dá)到平衡后，檢測(cè)器測(cè)出一段時(shí)間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時(shí)間軸。
·噪音（noise）——基線信號(hào)的波動(dòng)。不正常的噪音通常因電源接觸不良或瞬時(shí)過(guò)載、檢測(cè)器不穩(wěn)定、流動(dòng)相含有氣泡或色譜柱被污染所致。
·漂移（drift）——一段時(shí)間內(nèi)基線隨時(shí)間的緩緩變化。
·色譜峰（peak）——組分流經(jīng)檢測(cè)器時(shí)響應(yīng)的連續(xù)信號(hào)產(chǎn)生的曲線。或色譜曲線上的突起部分。
·拖尾因子（tailing factor，T）——用以衡量色譜峰的對(duì)稱(chēng)性。也稱(chēng)為對(duì)稱(chēng)因子（symmetry factor）或不對(duì)稱(chēng)因子（symmetry factor）。

T=W_0.05h\\2d₁

W_0.05h：0.05峰高處的峰寬

d₁：峰極大到峰前沿之間的距離

·峰底——基線上峰的起點(diǎn)至終點(diǎn)的連線。
·峰高（peak height,h）——峰的zui高點(diǎn)至峰底的距離。
·峰寬（peak width,W）——峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作兩條切線與基線的兩個(gè)交點(diǎn)間的距離。W＝4σ
·半峰寬（peak width at half-height，W_h/2）——峰高一半處的峰寬。W_h/2＝2.355σ
·標(biāo)準(zhǔn)偏差（standard deviation，σ）——正態(tài)分布曲線x＝±1時(shí)（拐點(diǎn)）的峰寬之半。正常峰的拐點(diǎn)在峰高的0.607倍處。標(biāo)準(zhǔn)偏差的大小說(shuō)明組分在流出色譜柱過(guò)程中的分散程度。σ小，分散程度小、極點(diǎn)濃度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。
·峰面積（peak area，A）——峰與峰底所包圍的面積。A＝2.507 σ h＝1.064 W_h/2 h
·死時(shí)間（dead time，t₀）——不保留組分的保留時(shí)間。
·死體積（dead time，V₀）——由進(jìn)樣器進(jìn)樣口到檢測(cè)器流動(dòng)池未被固定相所占據(jù)的空間。它包括4部分：進(jìn)樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙（被流動(dòng)相占據(jù)，Vm）、柱出口管路體積、檢測(cè)器流動(dòng)池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過(guò)程，其它3部分只起峰擴(kuò)展作用。為防止峰擴(kuò)展，這3部分體積應(yīng)盡量減小。V₀＝F×t₀（F為流速）
·保留時(shí)間（retention time，t_R）——從進(jìn)樣開(kāi)始到某個(gè)組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時(shí)間。
·保留體積（retention volume，V_R）——從進(jìn)樣開(kāi)始到某組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值時(shí)流出溶劑的體積。VR＝F×t_R
·調(diào)整保留時(shí)間（adjusted retention time，t'_R）——扣除死時(shí)間后的保留時(shí)間。t'R＝tR－t0
·調(diào)整保留體積（adjusted retention volume，V'_R）——扣除死體積后的保留體積。V'_R＝V_R－V₀或＝F×t'_R
·理論塔板數(shù)（theoretical plate number，N）——用于定量表示色譜柱的分離效率（簡(jiǎn)稱(chēng)柱效）。
·理論塔板高度（theoretical plate height，H）——每單位柱長(zhǎng)的塔板數(shù)。
·分配系數(shù)（distribution coefficient，K）——在一定溫度下，化合物在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，在固定相與流動(dòng)相中濃度之比。

K= C_S/C_M

C_S：為組分在固定相中的濃度

C_M：為組分在流動(dòng)相中的濃度

·容量因子（capacity factor，k'）——化合物在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)，在固定相與流動(dòng)相中的量之比。
·選擇性（selectivity factor，α）——相鄰兩組分的分配系數(shù)或容量因子之比。
·分離度（resolution，R）——相鄰兩峰的保留時(shí)間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率，表示相鄰兩峰的分離程度。